PRUEBA POTASA
OBJETIVO:
Esta prueba se realiza para poder saber si un cultivo de bacterias es de Gram + o Gram - sin necesidad de hacer una tinción.
FUNDAMENTO:
El KOH es capaz de disolver la capa de lipopolisacarido de la pared bacteriana de las Gram -, y esto se observa ya que al mezclar una muestra de bacterias con unas gotas de KOH al 3%, se forma como una mucosidad, y al separar el asa hacia arriba, queda un pequeño hilo. Por tanto, la presencia de ese hilillo indicará que es Gram -.
MATERIAL:
Porta
Asa de siembra
Gradilla
Bacterias 2 y 9
KOH (%)
Agua destilada
Matraz 100ml
Vidrio de reloj
Balanza
Pipeta Pasteur
PROCEDIMIENTO:
Hacemos los cálculos para saber cuanto KOH debemos pesar:
100 gramos ------- 90 puros
x ------------------- 3 puros
x = 3,33 granos
Pesamos un poco más de 3,33 gramos porque al pasarlo por el mortero perderemos producto. Lo machacamos para que sea más fino, y pesamos 3,33. Lo disolvemos en 100ml de agua destilada.
Cogemos unas dos o tres gotas con una pipeta pasteur, y las ponemos en un porta. A continuación, cogemos una muestra de bacterias con el asa, y la disolvemos con el KOH del porta. Valoramos si se ha formado mucosa o no.
RESULTADOS:
Tanto con la bacteria 2, como con la bacteria 9, las pruebas dan un resultado negativo, es decir, se clasifican como Gram positivas.
Esta prueba se realiza para poder saber si un cultivo de bacterias es de Gram + o Gram - sin necesidad de hacer una tinción.
FUNDAMENTO:
El KOH es capaz de disolver la capa de lipopolisacarido de la pared bacteriana de las Gram -, y esto se observa ya que al mezclar una muestra de bacterias con unas gotas de KOH al 3%, se forma como una mucosidad, y al separar el asa hacia arriba, queda un pequeño hilo. Por tanto, la presencia de ese hilillo indicará que es Gram -.
MATERIAL:
Porta
Asa de siembra
Gradilla
Bacterias 2 y 9
KOH (%)
Agua destilada
Matraz 100ml
Vidrio de reloj
Balanza
Pipeta Pasteur
PROCEDIMIENTO:
Hacemos los cálculos para saber cuanto KOH debemos pesar:
100 gramos ------- 90 puros
x ------------------- 3 puros
x = 3,33 granos
Pesamos un poco más de 3,33 gramos porque al pasarlo por el mortero perderemos producto. Lo machacamos para que sea más fino, y pesamos 3,33. Lo disolvemos en 100ml de agua destilada.
Cogemos unas dos o tres gotas con una pipeta pasteur, y las ponemos en un porta. A continuación, cogemos una muestra de bacterias con el asa, y la disolvemos con el KOH del porta. Valoramos si se ha formado mucosa o no.
RESULTADOS:
Tanto con la bacteria 2, como con la bacteria 9, las pruebas dan un resultado negativo, es decir, se clasifican como Gram positivas.
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