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Mostrando entradas de enero, 2018

PRUEBA OXIDASA

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FUNDAMENTO: La prueba se realiza con unas tiras reactivas que tienen impregnado fenilendiamina, y en presencia de oxigeno, si la bacteria posee una enzima llamada citocromooxidasa. Esto se observa mediante un cambio a color azul, si este se produce, la prueba es positiva. OBJETIVO:  Esta prueba se realiza con el fin de poder clasificar al tipo de bacteria de una forma más, según si es oxidasa positiva o negativa, lo que nos puede ayudar a identificar especie y género de la bacteria. MATERIAL: Tiras reactivas con fenilendiamina Asa de siembra Bacterias 2 y 9 Mechero bunsen PROCEDIMIENTO: Esterilizamos el asa en el mechero bunsen, y cogemos una muestra de la bacteria, y la depositamos en la tira reactiva. Si se produce un cambio a color azul, la prueba es positiva, si no, negativa. RESULTADOS: La prueba de un resultado positivo para la bacteria numero 9 y negativo para la número 2.                                     9, oxidasa positivo                        2, oxidasa

PRUEBA CATALASA

FUNDAMENTO: Una de las enzimas que pueden tener las bacterias es la catalasa, la cual tiene la capacidad de descomponer el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. Al producirse esta descomposición, se observan algunas burbujas, debido a la aparición del oxigeno. OBJETIVO: Esta prueba se realiza con el fin de poder clasificar al tipo de bacteria de una forma más, según si es catalasa positiva o negativa, lo que nos puede ayudar a identificar especie y género de la bacteria. MATERIAL: Tubo de ensayo Agua oxigenada (peróxido de hidrógeno) Asa de siembra Bacterias 2 y 9 Porta Mechero bunsen PROCEDIMIENTO: Echamos un poco de agua oxigenada en un tubo de ensayo, y con el asa de siembra esterilizada, cogemos una muestra de la bacteria número 2, y la introducimos en el agua oxigenada, movemos un poco de lado a lado, y comprobamos si aparecen burbujas. En el caso de que aparezcan, la prueba será positiva, y si no aparecen, negativa. Repetimos el mismo procedimiento con la

SIEMBRA POR AGOTAMIENTO EN AGAR SANGRE, LEVINE Y MCCONKEY

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OBJETIVO: Mediante la siembra de bacterias en estos medios, con diferentes composiciones, podremos conocer algunas funciones específicas de las bacterias que nos ayudaran a clasificarlas taxonómicamente. FUNDAMENTO: Los medios sobre los que se realiza la siembra están compuestos por diferentes ingredientes, de los cuales algunos inhiben el crecimiento de algunas bacterias, otros las ayudan a proliferar, y otros nos permiten observar funciones de la bacteria mediante cambios de color (pH) o aparición de estrías incoloras, por ejemplo. MATERIAL: Cultivo celular número 2 y 9 Asa de siembra Mechero Bunsen Gradilla Placas con agar sangre. Placas con agar Levine (10g/l de peptona, 10g/l de lactosa, 3g/l de K2HPO4, 0,4g/l amarillo eosina, 0,065g/l de azul de metileno, 14g/l de agar) Placas con agar McConkey (10g/l de lactosa, 3g/l de peptonas, 1,5g/l de sales biliares, 17g/l de peptona de gelatina, 0,03g/l de rojo neutro, 5g/l de cloruro de sodio, 0,001g/l de cristal violeta, 13,5g/

ANTIBIOGRAMA EN MUELLER HINTON

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FUNDAMENTO En esta práctica realizaremos una siembra en cesped, en placa con Mueller Hinton, para colocar distintos antibióticos y conocer qué antibiótico es el idóneo para inactivar la población. OBJETIVO El objetivo final de la práctica es identificar el antibiótico que va a ser capaz de inhibir el crecimiento bacteriano. MATERIAL Medios Mueller Hinton Bacterias 2 y 9 SSF Tubos de ensayo Gradilla Asa de siembra Mechero bunsen Asa de Digralsky Vaso de precipitados Alcohol Pinzas Antibióticos (Colistín, amoxicilina + Ac. clavulánico, Amikacin, Azlocillin) Micropipeta de 100 microlitros Puntas de micropipeta COMPOSICIÓN MUELLER HINTON 1,5 g/l de Almidón 2 g/l de infusión de carne 17,5g/l de peptona de caseína hidrolizada 17g/l de agar pH: 7,4 PROCEDIMIENTO Echamos en un tubo de ensayo un poco de SSF. Cogemos el tubo con nuestra bacteria, esterilizamos el asa de platino, pasamos la boca del tubo por el mechero y cogemos un poco de muestra. Volvem

ESCALA DE MCFARLAND

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FUNDAMENTO: En esta práctica vamos a realizar 11 disoluciones de cloruro de bario y ácido sulfúrico, con distintas concentraciones, las cuales darán lugar a distintos niveles de turbidez. Estos patrones se podrán comparar posteriormente con suspensiones bacterianas, para determinar el número de bacterias que hay en la suspensión. OBJETIVO: Realizar la escala de McFarland para compararla más tarde con suspensiones bacterianas. MATERIAL: 11 tubos Cloruro de bario Ácido sulfúrico Pipeta de 10ml y de 5ml Micropipetas Vaso de precipitados Puntas de pipeta Cremallera Gradilla Cabina Matraces CÁLCULOS 0,5 -  0,125ml de BaCl2 y 24,875ml de H2SO4 1 - 0,2ml de BaCl2 y 24,75ml de H2SO4 2 - 0,5ml de BaCl2 y 24,5ml de H2SO4 3 - 0,75ml de BaCl2 y 24,25ml de H2SO4 4 - 1ml de BaCl2 y 24ml de H2SO4 5 - 1,25ml de BaCl2 y 23,75ml de H2SO4 6 - 1,5ml de BaCl2 y 23,5ml de H2SO4 7 - 1,75ml de BaCl2 y 23,2