MICROBIOLOGÍA BLANCA ESPÍN

FUNDAMENTO: En esta tinción vamos a teñir las esporas, que son dificiles de teñir por su situación y su estructura, por lo que vamos a aplicar un colorante en caliente, para facilitar su penetración, vamos a lavar para retirar el exceso y vamos a aplicar un colorante de contraste para teñir las bacterias. Las esporas aparecerán verdes y las bacterias rosas. OBJETIVO: Realizamos esta tinción con el fin de saber si nuestra muestra de bacterias es de un tipo de bacterias que esporulan. MATERIAL: Mechero bunsen Muestra de bacterias 2 y 9, ESP 1 y ESP 2 Portas Asa de siembra Gradilla SSF Soporte para portas Torunda de algodón y gasa Verde malaquita Safranina Alcohol Agua destilada Microscopio óptico PROCEDIMIENTO: Realizamos una extensión de la muestra con SSF y la fijamos con calor. Llevamos la extensión al fregador y la ponemos encima del soporte, cubrimos la extensión totalmente con verde malaquita.  Mojamos la torunda de algodón y gasa en alcohol, sin que

FUNDAMENTO:  Hay un tipo de bacterias, llamadas bacterias acido-alcohol resistentes (BAAR) que tienen una pared bacteriana que presenta resistencia a la decoloración con una mezcla de ácido y alcohol. Para teñir este tipo de bacterias, primeramente debemos aplicar un colorante en caliente, ya que el calor va a fluidificar la pared que tienen estas bacterias, con ácidos micolicos y cera, y el colorante va a poder penetrar, y luego se realiza una decoloración con acido-alcohol en frío, para que la pared se solidifique y el colorante no pueda salir. En bacterias no - BAAR esta decoloración arrastraría cualquier tinción previa. También se usa un colorante de contraste para teñir las no BAAR, por lo que al microoscopio, las BAAR se observan rojas y las no BAAR azules. OBJETIVO: Realizar la tinción con el fin de identificar los tipos bacterianos según su resistencia a la decoloración con una mezcla de acido - alcohol. MATERIAL: Mechero bunsen Muestra de bacterias 2 y 9, AAR 1 y AA

FUNDAMENTO: Las bacterias gram positivas tienen una pared bacteriana muchisimo más gruesa que las bacterias gram negativas, por lo que al teñirlas con un colorante, este penetra hasta el fondo de la pared en las positivas y se queda practicamente en la superficie de las negativas, y al lavar con alcohol y acetona el colorante de las negativas se va casi todo, por lo que al microscopio las podemos diferencias por el color, ya que en las positivas es lila, y en las negativas es rosa. OBJETIVO: Realizar una tinción para conocer el tipo de bacterias de un cultivo, si son gram positivas o gram negativas. MATERIAL: Mechero Bunsen Portas Pipetas pasteur Asa de siembra Muestra de bacterias 2 y 9 Soporte para portas Batea Lugol Mezcla 1/1 de alcohol y acetona Cristal violeta Agua destilada Safranina PROCEDIMIENTO: Encendemos el mechero bunse, esterilizamos el asa de siembra y cogemos una muestra de bacterias. La depositamos en el porta y realizamos una extensión, y la

FUNDAMENTO: Al introducir bacterias en un medio nutritivo e incubarlas a una temperatura determinada durante cierto tiempo, vamos a conseguir la proliferación de un cultivo de células, que van a aumentar su número exponencialmente. OBJETIVO: Conseguir un cultivo de bacterias en un medio sólido. MATERIAL: Cultivo celular número 2 y 9 Asa de siembra de plástico Mechero Bunsen Gradilla Placa con medio sólido PROCEDIMIENTO: Encendemos el mechero, que se usa en este caso simplemente para trabajar en un ambiente de esterilidad, cogemos un asa de siembra estéril y cerramos bien el paquete . Abrimos la placa ya cultivada y deslizamos suavemente por la zona que esté cultivada para coger una muestra, y cerramos la placa. Abrimos la placa que está sin sembrar, y que debemos rotular previamente, y realizamos la siembra en surcos de la misma forma que con el asa de platino, pero sin que unos surcos y otros se toquen. Cerramos la placa y la metemos a la estufa a 37ºC d

FUNDAMENTO: Al introducir bacterias en un medio nutritivo e incubarlas a una temperatura determinada durante cierto tiempo, vamos a conseguir la proliferación de un cultivo de células, que van a aumentar su número exponencialmente. OBJETIVO: Conseguir un cultivo de bacterias en un medio sólido. MATERIAL: Cultivo celular número 2 y 9 Asa de siembra Mechero Bunsen Gradilla Placa con medio sólido PROCEDIMIENTO: Rotulamos la placa de Petri con la fecha y la siembra que vayamos a realizar. Encendemos el mechero y esterilizamos el asa de platino. Cogemos la placa en la que está uno de los cultivos, y clavamos el asa en cualquier sitio donde no haya crecimiento para enfriar el asa de siembra. Vamos a la zona con crecimiento y deslizamos el asa por encima para arrastras una muestra representativa del cultivo. Cerramos la placa y cogemos la placa que no está sembrada aún, la abrimos y desde arriba empezamos a depositar la muestra en zig-zag, sin llegar al centro de la placa, la c

FUNDAMENTO: Al introducir bacterias en un medio nutritivo e incubarlas a una temperatura determinada durante cierto tiempo, vamos a conseguir la proliferación de un cultivo de células, que van a aumentar su número exponencialmente. OBJETIVO: Conseguir un cultivo de bacterias en un medio sólido. MATERIAL: Cultivo de células de la mucosa oral Asa de siembra Mechero Bunsen Gradilla Tubo con medio sólido PROCEDIMIENTO: Encendemos el mechero Bunsen y esterilizamos el asa de platino. A continuación, cogemos el tubo que contiene la muestra y destapamos, pasamos el tubo por el mechero e introducimos el asa de siembra. Antes de coger muestra, tenemos que enfriarla. En caso de que fuera un cultivo en medio sólido en tubo, deberíamos empezar a coger la muestra desde arriba hacia abajo. En este caso, al ser medio líquido, introducimos el asa hasta abajo y movemos lateralmente para coger la mayor carga de muestra posible. Sacamos el asa y volvemos a pasar el tubo por el mechero, y t

FUNDAMENTO: Cuando añadimos un colorante a una muestra de cualquier tipo de célula o microorganismo, lo que conseguimos es aumentar el contraste entre las estructuras celulares y el medio en el que se encuentran, con lo cuál, es más fácil visualizar luego la preparación. Mediante este tipo de tinción, los microorganismos que observemos van a estar muertos. OBJETIVO: Realizar una tinción para facilitar la observación de una muestra de cultivo celular. MATERIAL: Papel de filtro Gradilla Asa de siembra Mechero bunsen Actimel Portaobjetos Pipeta pasteur Azul de metileno Soporte para tinciones PROCEDIMIENTO: Encendemos el mechero Bunsen, y esterilizamos el asa de siembra. La introducimos en el Actimel y movemos para coger la mayor carga de muestra posible. Depositamos la gota en el porta, y realizamos una extensión, repartiendo la muestra por la mayor superficie del porta posible. Para fijar la muestra al porta, pasamos el porta por encima de la llama del mechero, hast

  FUNDAMENTO: Cuando añadimos un colorante a una muestra de cualquier tipo de célula o microorganismo, lo que conseguimos es aumentar el contraste entre las estructuras celulares y el medio en el que se encuentran, con lo cuál, es más fácil visualizar luego la preparación. Mediante este tipo de tinción, los microorganismos que observemos van a estar vivos, con lo cual vamos a poder observar sus movimientos. OBJETIVO: Realizar una tinción para facilitar la observación de una muestra de cultivo celular. MATERIAL: Papel de filtro Gradilla Asa de siembra Mechero bunsen Cultivo en medio líquido Portaobjetos Cubre Pipeta pasteur Matraz 100ml Vaso de precipitados Rojo metilo Micropipeta 1ml Embudo PROCEDIMIENTO Para poder realizar la tinción, primero debemos preparar la dilución del colorante. Vamos a usar rojo metilo en una dilución 1/100. Prepararemos 100 ml de dilución, por lo que cogeremos 1ml de colorante y 99 de H2O destilada. Echamos un poco de agua en el vas